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Mycobacterium tuberculosis


제 품 명 : OMEGA TB COMPLEX PLUS


검사목적 : ELISA 방법에 의한 혈청 내에서 Mycobacterium tuberculosis complex species

          항체의 정성 및 정량분석.


검사 전 알아야 할 사항

 1. 시약을 실온으로 준비한다.

 2. wash buffer는 증류수와 1: 20비율로 섞어 사용한다. (wash buffer 50ml + 증류수 950ml) 

 3. serum diluent, conjugate, substrate, Stop 시약은 그대로 사용한다.

Procedure

 1. 검체를 Serum Diluent로 1 : 50비율로 희석한다.( 검체 20 ㎕ + serum diluent 1000㎕)

 2. control과 희석한 검체를 각 well에 100㎕ 씩 분주한다. (control은 희석하지 않는다.)

 3. 37℃에서 60분간 incubation한다.

 4. 준비된 wash buffer로 3번 세척한다.

 5. blank를 제외하고 모든 well에 anti-human HRP IgG conjugate를 100㎕씩 분주한다.

 6. 5초간 잘 섞는다.

 7. 37℃에서 30분간 incubation한다.

 8. 준비된 wash buffer로 3번 세척한다 

 9. blank를 제외하고 모든 well에 substrate를 100㎕ 씩 분주한다.

10. 직사광선이 들지 않는 37℃에서 15분간 incubation한다.

11. blank를 제외하고 stop reagent를 100㎕ 씩 분주한다.

12. stop reagent를 넣자마자 450nm에서 측정한다.

   

계  산  법 :   450nm에서 측정한 control의 O.D 와 농도를 이용하여 그래프로 그린다.

결 과  판 정 : 검체를 50배 희석하였으므로 U/ml × 50.

                  200 U/ml 보다 작을 때              negative.

                  200 - 450 U/ml                     Low positive

                  450 U/ml 이상                      Positive

검사시 허용범위 : Control 2U/ml≥0.200

CUT OFF 값 : control 4 U/ml

                   Low positive : control 4 U/ml 과 control 4 U/ml × 1.5 의 O.D

                Positive : control 4 U/ml × 1.5 의 O.D  이상.

controls  수 : negative, control 2U/ml, control 4U/ml, control 8U/ml, control 16U/ml

검       체 : serum

규       격 : 12 X 8 well strips